聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，簡(jiǎn)稱(chēng)PCR，是一種將幾個(gè)或幾十個(gè)拷貝數(shù)DNA段擴(kuò)增至上百萬(wàn)份拷貝的方法，這是迄今為止為重要的技術(shù)之一。PCR技術(shù)的影響不僅僅局限于生物科學(xué)領(lǐng)域，幾乎人人都可以感受到PCR所帶來(lái)的改變，在親子鑒定以及犯罪調(diào)查中PCR技術(shù)便有廣泛應(yīng)用。而人類(lèi)基因組計(jì)劃，這一具有劃時(shí)代意義的測(cè)序工程，如果缺少了PCR技術(shù)手段則根本無(wú)法開(kāi)始。
分子實(shí)驗(yàn)-PCR：普通電泳PCR實(shí)驗(yàn)的原理是DNA分子在電場(chǎng)中會(huì)向正極方向移動(dòng)。不同長(zhǎng)度的DNA由于受到凝膠介質(zhì)的阻力不同，表現(xiàn)為不同的遷移率而被分開(kāi)。
分子實(shí)驗(yàn)-PCR具有的優(yōu)點(diǎn)：
1、封閉反應(yīng)，無(wú)需PCR后處理。
2、特異性強(qiáng)，靈敏度高。
3、采用對(duì)數(shù)期分析，摒棄終點(diǎn)數(shù)據(jù)，定量準(zhǔn)確。
4、定量范圍寬，可達(dá)到10個(gè)數(shù)量級(jí)。
5、儀器在線式實(shí)時(shí)檢測(cè)，結(jié)果直觀，避免人為判斷。
6、可實(shí)現(xiàn)一管雙檢或多檢。
7、操作安全，縮短時(shí)間，提高效率。
分子實(shí)驗(yàn)電泳緩沖液選擇：
電泳緩沖液為具有緩沖能力的離子溶液，通常在凝膠中使用，以保證電流流動(dòng)同時(shí)防止pH值變化。電泳過(guò)程中，由于電子流動(dòng)，負(fù)極逐漸偏向堿性，正極逐漸偏向酸性，從而導(dǎo)致水電解和pH值改變。氫氣和氧氣的釋放會(huì)引起電極起泡，這是凝膠運(yùn)行的跡象。理想情況下，電泳緩沖液和凝膠制備緩沖液應(yīng)相同，以確保有效的導(dǎo)電性。電泳緩沖液的選擇取決于樣品大小、運(yùn)行時(shí)間和后電泳過(guò)程，其中醋酸鹽和硼酸是常用的兩種緩沖液。
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